Badanie obejmowało bliskie kontakty tego pacjenta i próbkę dobrowolnych ochotników, w wieku 18 lat lub starszych, z trzech lokalnych uniwersytetów i pubu. Strony te zostały wybrane po szczegółowych wywiadach Pacjenta 3 i powiązanych bliskich osób, które zidentyfikowały sieci społecznościowe w tych witrynach. Badanie przeprowadzono w ramach publicznej reakcji zdrowotnej i nie uznano go za badanie; w związku z tym nie był wymagany przegląd instytucjonalny dotyczący ochrony ludzi. Studentów uniwersyteckich zaproszono do udziału w wyznaczonych miejscach i określonych godzinach, a także rekrutowano przechodniów. Osoby niestałe, które były powiązane z uniwersytetami, również mogły wziąć udział. Właściciel pubu zorganizował spotkanie, na które zaproszono pracowników i stałych patronów. Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną lub ustną zgodę i udzielili odpowiedzi na pytania dotyczące cech demograficznych i czynników ryzyka związanych z przewozem (szczegółowe informacje można znaleźć w Dodatkowym dodatku, dostępnym wraz z pełnym tekstem tego artykułu na stronie internetowej). Próbki uzyskano przez wymazanie tylnej części gardła i migdałków sterylnym wymazem Dacron lub rayon. Próbki inokulowano bezpośrednio na zmodyfikowany agar Thayer Martin (Remel) i inkubowano w pojemnikach z zamkniętymi ditlenkami węgla, zamkniętych w temperaturze 37 ° C. Płytki zbadano po 24, 48 i 72 godzinach, a podejrzane kolonie poddano dalszej charakteryzacji.
Identyfikacja testów na wrażliwość i przeciwdrobnoustrojowe
Izolaty N. meningitidis zidentyfikowano i scharakteryzowano za pomocą konwencjonalnych metod mikrobiologicznych. Wyniki serologiczne określano na podstawie aglutynacji poślizgowej i testów PCR w czasie rzeczywistym (szczegóły na ten ostatni, patrz Dodatek dodatkowy). Wszystkie izolaty badano na podatność na cyprofloksacynę, azytromycynę, penicylinę G, ryfampinę, tetracyklinę i ceftriakson za pomocą Etestu (AB Biodisk) lub płyt z mikropęcherzykami bulionowymi (mikrobiologiczne PML). Zastosowano wartości graniczne minimalnego stężenia hamującego (MIC) ustalone przez Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) dla mikrorozcieńczeń w bulionie.8 Niezidentyfikowane izolaty zostały potwierdzone za pomocą mikrorozcieńczenia bulionu.
Testy wrażliwości przeprowadzono przy użyciu Etest na 155 izolatach N. meningitidis otrzymanych w Centrach Kontroli i Zapobiegania Chorobom (CDC) od państwowych i lokalnych wydziałów zdrowia za pośrednictwem systemu nadzoru Aktywnego Bakteryjnego Rdzenia od stycznia 2007 do stycznia 2008. Aktywny nadzór Bakteryjny Rdzenia jest aktywny, laboratoryjny i oparty na populacji system nadzoru w 10 stanach, w tym w stanie Minnesota, obejmujący 13% populacji USA.9
Charakterystyka molekularna
Izolaty N. meningitidis oporne na cyprofloksacynę porównywano za pomocą elektroforezy żelowej w polu pulsacyjnym przy użyciu endonukleazy restrykcyjnej NheI (Promega), jak opisano wcześniej. 10 Sekwencja i typowanie sekwencji wielorzędowych dla alleli dla porin A (porA), porin B (porB) i żelazowy receptor enterokinyny (fetA) przeprowadzono jak opisano wcześniej 11-14 (szczegóły patrz dodatek dodatkowy). Typy sekwencji przypisano poprzez zapytanie do Neisseria Multi Locus Sequence Typing i strony internetowe neisseria.org. 14-17 Region determinujący oporność na chinolony (QRDR) genów kodujących podjednostkę A obu gyrazy DNA (gyrA) i topoizomerazę DNA IV ( parC) z gatunku neisseria zostały zamplifikowane za pomocą PCR i zostały zsekwencjonowane za pomocą nowych starterów pochodzących z identycznych regionów w N
[patrz też: długi weekend czerwcowy, Rezonans Warszawa, serwis niszczarek ]
Powiązane tematy z artykułem: długi weekend czerwcowy Rezonans Warszawa serwis niszczarek